-- 作者： n124553 -- 發表時間： 2007/06/17 09:26pm 有毛氈苔組培經驗的大大請教一下， 小弟最近取毛氈苔葉子來做組織培養一直失敗 看來都是殺菌不完全，使得2-3天後就發霉 我想是葉子上的毛使得殺菌不徹底， 小弟的消毒做法如下： 1 取下葉子後用75%的酒精泡20秒 2 再用2%漂白水泡10分鐘(預泡500ml 加幾滴 tween 80) 泡太久葉子可能會褐化，（長毛又脆弱真難搞），不知這樣的消毒夠嗎? 3 移入先噴過漂白水的操作箱中 4 用火燒過夾子等物品後，從試管取出葉子，將切口再切掉一點(之前這裡常發霉) 5 用夾子夾住傷口處，用無菌水直接沖洗數次 6 直接丟到培養瓶中(夾子沒碰到瓶口)，快速封好 7 發霉(悶呀) 後來上網看到外植體消毒要配合超音波清洗機較乾淨 所以又買了一台回來玩 沒想到震個20秒不到 葉子就出現破洞狀，太猛了，後來停止 泡足10分，跑上述流程還是發霉，(沒泡酒精，感覺酒精太強) 不知失敗在那，難道是試管跟橡膠蓋子沒用火燒過嗎? 想說泡漂白水了所以就沒額外殺菌了 不知各位大大有何高見? -- 作者： csyin -- 發表時間： 2007/06/17 09:30pm 用葉子作為培殖體...很難... 如果沒事先把植物移到比較乾淨的環境栽培, 那樣長出來的葉子都沾滿了黴菌孢子, 而孢子對殺菌處理的耐受度很高... 用種子會比較簡單... -- 作者： n124553 -- 發表時間： 2007/06/17 10:12pm 真的嗎?難道真的無法成功? 另外請教csyin 大大， 毛氈苔的種子那麼小要如何殺菌?小到快看不見了 是用長玻璃吸管來操作嗎? 消毒流程法大概如何呢? 謝謝! -- 作者： csyin -- 發表時間： 2007/06/17 10:26pm 那個種子的消毒方法沒什麼特別的啊! 就照平常的做法就好了... 種子用滴管吸起來就好了. 另外, 我沒說葉子一定做不出來, 問題是在於前處理做得好不好而已... 再來就是如果做的量夠多, 用瓶海戰術, 總會做出一瓶無菌的吧...XD -- 作者： n124553 -- 發表時間： 2007/06/17 10:40pm 也就是說用葉子做 失敗率很高就對了! -- 作者： db170717 -- 發表時間： 2007/06/17 10:46pm [quote][b]下面引用由[u]n124553[/u]在 [i]2007/06/17 10:12pm[/i] 發表的內容：[/b] 真的嗎?難道真的無法成功? 另外請教csyin 大大， 毛氈苔的種子那麼小要如何殺菌?小到快看不見了 是用長玻璃吸管來操作嗎? ... [/quote] 毛氈苔無菌播種其實很簡單 只要用到很容易拿到ㄉㄧ樣小東西~~濾紙 用濾紙把種子包起來 再用迴紋針夾住 一起丟到漂白水裡殺菌 最後用夾子把種子夾進瓶裡 這樣過程應該夠清楚了吧! PS.用吸管吸種子常會發生種子黏在吸管裡ㄉ情形      到時是要放棄種子還是要為了那一兩顆種子奮鬥?      用濾紙就可以避免,而且濾紙是白色ㄉ,種子就一覽無遺      其他ㄉ食蟲植物也可以比照辦理喔! :em15: -- 作者： n124553 -- 發表時間： 2007/06/17 11:10pm db170717  大大 這招高呀! 但是用夾子應還是很難夾吧! 用解剖針會不會較容易呢？ -- 作者： db170717 -- 發表時間： 2007/06/17 11:26pm [quote][b]下面引用由[u]n124553[/u]在 [i]2007/06/17 11:10pm[/i] 發表的內容：[/b] db170717  大大 這招高呀! 但是用夾子應還是很難夾吧! 用解剖針會不會較容易呢？ [/quote] 好啦,最終絕招 如果種子真ㄉ太小 用刀子將有種子ㄉ濾紙割一小塊 用夾子夾進培養瓶裡 在培養基上沾一沾 PS.噓~~~~目前為止很少失敗,只跟你說,不要告訴別人喔! :em15: -- 作者： playerst -- 發表時間： 2007/06/17 11:50pm [quote][b]下面引用由[u]db170717[/u]在 [i]2007/06/17 11:26pm[/i] 發表的內容：[/b] 好啦,最終絕招 如果種子真ㄉ太小 用刀子將有種子ㄉ濾紙割一小塊 用夾子夾進培養瓶裡 ... [/quote] 噓~跟你說喔~我們都已經知道了....