-- 作者： csyin -- 發表時間： 2004/03/24 05:41pm 白色一團一團的就是老鼠的胚胎幹細胞, 其他的是老鼠的纖維母細胞.... 養得不好啦 :em15:  :em15:  :em15: -- 作者： orchids -- 發表時間： 2004/03/24 09:49pm [quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2004/03/24 05:41pm[/i] 發表的內容：[/b] 白色一團一團的就是老鼠的胚胎幹細胞, 其他的是老鼠的纖維母細胞.... 養得不好啦 [/quote] 解說一下 -- 作者： csyin -- 發表時間： 2004/03/25 01:00pm 養胚胎幹細胞的王道就是能夠不斷增殖下去但又不改變其原有的特性... :em17: 所謂原有的特性就是胚胎幹細胞維持在未分化的狀態. 要維持未分化的方法目前有兩種, 一種是用抑制劑(非常貴10ug=10000元, 可配一公升培養液), 另一種就是將胚胎幹細胞和纖維母細胞共同培養(纖維母細胞會抑制胚幹細胞的分化). 當然實際養的過程還有許多問題, 像是纖維母細胞的品質, 血清的品質都會影響. 之前可以養到比現在大幾倍的細胞團都還能維持不錯的狀態, 但現在只能養到這麼大就得繼代了. :em10: -- 作者： 鹿角蕨 -- 發表時間： 2004/03/31 01:21pm 哇...... 繼續加油 以後除了養食蟲植物 還能在房間養一些器官....比如會跳的心臟!!! ^  ^ -- 作者： csyin -- 發表時間： 2004/03/31 04:05pm [quote][b]下面引用由[u]鹿角蕨[/u]在 [i]2004/03/31 01:21pm[/i] 發表的內容：[/b] 還能在房間養一些器官....比如會跳的心臟!!! ^  ^ [/quote] 這個已經養出來了...很簡單 :em01: 可是大家都做得到, 而且沒產業價值 :em10: -- 作者： 鹿角蕨 -- 發表時間： 2004/04/03 11:08am [quote][b]下面引用由[u]csyin[/u]在 [i]2004/03/31 04:05pm[/i] 發表的內容：[/b] 這個已經養出來了...很簡單   可是大家都做得到, 而且沒產業價值 [/quote] 是這樣嗎???? 沒價值? :em14: 不能用來移植用嗎? -- 作者： marksu -- 發表時間： 2004/07/07 09:23am 1.請問目前養 ES cells 的目的? 2.現在繼代到第幾代了?繼代數愈高染色體不正常的比例愈高 3.從圖上觀查, 好像有些differentiation 現像 -- 作者： csyin -- 發表時間： 2004/07/07 12:51pm [quote][b]下面引用由[u]marksu[/u]在 [i]2004/07/07 09:23am[/i] 發表的內容：[/b] 1.請問目前養 ES cells 的目的? 2.現在繼代到第幾代了?繼代數愈高染色體不正常的比例愈高 3.從圖上觀查, 好像有些differentiation 現像 [/quote] 1. 當然是做研究了 :em03: 2. 這是cell line (D3), 不知是第幾代了... 3. 是的... :em10: 所以以後不用feeder來養, 要改用LIF了... :em16: -- 作者： snow -- 發表時間： 2004/07/07 03:19pm 呼~這也是我們正在教的東西呢 不過才一年級還沒進實驗室~"~ -- 作者： csyin -- 發表時間： 2004/07/08 06:51pm 你可以常常去實驗室坐坐, 聊聊天, 跟實驗室的人保持良好關係, 就容易有機會了... :em15: -- 作者： marksu -- 發表時間： 2004/07/13 09:56am csyin: 為了維持ES cell in vitro culture 下不進行"分化", 培養時會加入Feeder layer 及培養液中添加適量的LIF.不知你的feeder layer是STO cells 還是MEF, 目前以Mouse Embryo Fibroblast (MEF)當feeder layer抑制ES cell的分化作用較為理想, 所以不建議你去除feeder layerㄝ因為光靠LIF的抑制分化效果較差, 兩者一起用最理想.只不過MEF準備較為痲煩. -- 作者： csyin -- 發表時間： 2004/07/13 12:27pm 唉...就是因為feeder cell的問題一堆, 才想要用LIF... :em19: 我的feeder是用MEF, MEF好像不易保存... 我一直是用同一批得到的MEF, 培養液沒換別的, 連FBS的批號都沒換(因為事先買了一堆), 但總之一年多前與現在真是差很多... 一年多前我才剛學養mouse ES cells, 當時的操作技術不好, 但是養得比現在還好... 我是認為是feeder的問題... 因為以前養feeder時生長速度都很快, 但約半年前發覺成長速度開始慢下來, ES cells的品質也越來越差... :em16: 我現在打算用Gibco出的ES cell的無血清培養基, 同時用LIF來試試... 因為有論文是這樣做, 而且又做類似的題目, 當然是非常令人心動啊 :em09: 還有一點..因為現在的趨勢是發展no feeder, no serum的培養法, 所以遲早都是要做的啦 :em18: