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主題標題：老鼠的胚胎幹細胞

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文章一覽：老鼠的胚胎幹細胞 (新回覆在最前面,最多列出 6 個)　 [列出所有回覆]

csyin 發表於： 2004/07/13 12:27pm

唉...就是因為feeder cell的問題一堆, 才想要用LIF...
我的feeder是用MEF, MEF好像不易保存...
我一直是用同一批得到的MEF, 培養液沒換別的, 連FBS的批號都沒換(因為事先買了一堆),
但總之一年多前與現在真是差很多...
一年多前我才剛學養mouse ES cells, 當時的操作技術不好, 但是養得比現在還好...
我是認為是feeder的問題...
因為以前養feeder時生長速度都很快, 但約半年前發覺成長速度開始慢下來,
ES cells的品質也越來越差...

我現在打算用Gibco出的ES cell的無血清培養基, 同時用LIF來試試...
因為有論文是這樣做, 而且又做類似的題目, 當然是非常令人心動啊
還有一點..因為現在的趨勢是發展no feeder, no serum的培養法, 所以遲早都是要做的啦

marksu 發表於： 2004/07/13 09:56am

csyin:

為了維持ES cell in vitro culture 下不進行"分化", 培養時會加入Feeder layer 及培養液中添加適量的LIF.不知你的feeder layer是STO cells 還是MEF, 目前以Mouse Embryo Fibroblast (MEF)當feeder layer抑制ES cell的分化作用較為理想, 所以不建議你去除feeder layerㄝ因為光靠LIF的抑制分化效果較差, 兩者一起用最理想.只不過MEF準備較為痲煩.

csyin 發表於： 2004/07/08 06:51pm

你可以常常去實驗室坐坐, 聊聊天,
跟實驗室的人保持良好關係,
就容易有機會了...

snow 發表於： 2004/07/07 03:19pm

呼~這也是我們正在教的東西呢
不過才一年級還沒進實驗室~"~

csyin 發表於： 2004/07/07 12:51pm

下面引用由marksu在 2004/07/07 09:23am 發表的內容：
1.請問目前養 ES cells 的目的?
2.現在繼代到第幾代了?繼代數愈高染色體不正常的比例愈高
3.從圖上觀查, 好像有些differentiation 現像

1. 當然是做研究了
2. 這是cell line (D3), 不知是第幾代了...
3. 是的... 所以以後不用feeder來養, 要改用LIF了...

marksu 發表於： 2004/07/07 09:23am

1.請問目前養 ES cells 的目的?
2.現在繼代到第幾代了?繼代數愈高染色體不正常的比例愈高
3.從圖上觀查, 好像有些differentiation 現像

本論壇言論純屬發言者個人意見，與 塔內植物園 立場無關